商品介绍:
细胞名称 抗人TNFRII小鼠杂交瘤细胞;2H1
形态特性 母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体,抗原为人肿瘤坏死因子受体TNFRII。
培养条件 RPMI 1640 (w/o
Hepes) 10%FBS
传代方法 保持细胞密度在1×105~1×106 cells/ml之间,每周换液2~3次
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称
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抗人TNFRII小鼠杂交瘤细胞;2H1
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形态特性
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母细胞样
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型号
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EX0587
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实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Ivabradine 148849-67-6 中文名:盐酸伊伐布雷定 分子式:C27H37ClN2O5
小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISAKit ELISA. 96T/48T Ethyl
3,5-di-O-caffeoylquinate 143051-74-5 中文名:3,5-二咖啡酰奎宁酸乙酯 分子式:C27H28O12 度:98.0% 关键词:
小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白elisa试剂盒 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白试剂盒、小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Methyl
4-O-feruloylquinate 195723-10-5 中文名: 分子式:C18H22O9
小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Isosorbide dinitrate 中文名:硝酸异山梨酯 分子式:C6H8N2O8 度:98.0%
小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Isoniazid 中文名:异 分子式:C6H7N3O 度:98.0%
Uzarigenin digitaloside 中文名: 分子式:C30H46O8 鱼促性腺释放(GH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Uzarigenin 中文名: 分子式:C23H34O4 鱼类促性腺释放 ELISA. 96T/48T
ucralose 中文名:三氯蔗糖 分子式:C12H19Cl3O8 鱼类状腺原酸(T3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tryptophan 中文名: 分子式:C11H12N2O2 鱼类皮质醇(Coisol)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Troxerutin 中文名:曲克芦丁 分子式:C33H42O19 鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
抗人TNFRII小鼠杂交瘤细胞;2H16-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil 6972-78-7 中文名: 分子式:C5H6N4O3 Human exacellular signal regulated kinase (ERK) ELISA Kit 人细胞外信号调节激酶(ERK)ELISA试剂盒
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde 121660-37-5 中文名: 分子式:C19H14FNO HumanPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 人抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Pitavastatin
calcium 147526-32-7 中文名:匹伐他汀钙 分子式:C50H46CaF2N2O8 HumanCytochrome-C,Cyt-CELISA试剂盒人细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Methyl
3-cyclopropyl-3-oxopropionate 32249-35-7 中文名: 分子式:C7H10O3 组织HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定性检测试剂盒20次
3-Quinuclidinone 3731-38-2 中文名:3-奎宁环酮 分子式:C7H11NO HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
操作步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基,使293T细胞悬浮生长。
培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。